一、使用前准备

　　选择合适填料与规格：

　　C18适用于非极性化合物（如农药、多环芳烃）；

　　SAX/SCX用于离子型物质（如生物碱、有机酸）；

　　柱容量（如500mg/6mL）需匹配样品浓度，避免过载；

　　溶剂兼容性确认：

　　确保样品溶剂与活化/洗脱溶剂互溶，防止填料干裂或通道形成。

　　二、规范操作四步法

　　1、活化：

　　先用3–5mL强洗脱溶剂（如甲醇）润湿填料，再用3–5mL弱溶剂（如水或缓冲液）平衡，使吸附剂处于适宜吸附状态；

　　2、上样：

　　样品以慢速（1–2mL/min）流过柱床，避免沟流；高盐或高脂样品需离心/过滤预处理；

　　3、淋洗：

　　用中等强度溶剂（如5%甲醇水）去除杂质，切勿洗脱目标物；

　　4、洗脱：

　　用小体积强溶剂（如纯甲醇、乙腈）分2–3次洗脱，每次浸泡30秒后重力滴落，禁止抽干柱床（尤其反相柱），以防目标物不可逆吸附。

　　三、关键细节控制

　　全程保持填料湿润：干柱会导致回收率骤降；

　　使用正压装置时，控制流速均匀；

　　高通量实验建议使用96孔板式SPE，但需校准每孔流速一致性。