固相萃取柱使用中的问题，排查思路可以聚焦为“追踪目标物去向”——回收率低时，先判断目标物是在上样时流失、淋洗时被冲走，还是洗脱不彻底。

　　回收率低

　　最常见的原因是上样时保留不足，目标物随流出液穿透。判断方法是收集上样流出液进样分析，若检出目标物，说明填料对它的保留不够。对策包括：稀释样品降低溶剂强度、调节pH使目标物处于适合保留的状态（反相柱宜用中性或弱极性形式）、换用保留更强的填料。

　　若流出液中没有目标物，但洗脱回收率也偏低，则可能是洗脱不彻底。可增加洗脱体积、换用洗脱强度更高的溶剂，或调整洗脱液pH破坏目标物与填料的结合。

　　流速过慢或堵柱

　　液体滴不下来，通常是柱床堵塞或干涸所致。样品中的颗粒物、蛋白质或悬浮杂质会堵住填料间隙，上样前应离心或过滤。柱床一旦干涸，填料收缩开裂形成气阻，流速也会骤降，操作中应始终让填料浸润在溶剂中。

　　净化效果差

　　杂质干扰严重时，问题多出在淋洗强度不够或填料选择不当。淋洗液强度太弱，杂质洗不下来；太强则可能连带目标物一起流失。应调整淋洗液配比，在“洗掉杂质”和“保留目标物”之间找到平衡。

　　排查时建议分步收集上样液、淋洗液和洗脱液分别检测，这样能直接定位目标物在哪一步损失，避免盲目调整条件。